4T1+luc小鼠乳腺癌細胞+luc

,4T1 luc

貨號：YJ-m068（4T1種屬鑒定）

價(jià)格： 3200.0

規格： 1*10 ⁶

細胞介紹

4T1 是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥(niǎo)嘌噙抗性細胞株。當注射到BALB/c 小鼠中時(shí)，4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉移腫瘤，可轉移到肺，肝，淋巴結和大腦，同時(shí)在注射部位形成始發(fā)灶。誘導轉移時(shí)不需要摘除始發(fā)灶。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長(cháng)與轉移特性與人體中的乳腺癌十分相近。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動(dòng)物模型。

4T1-誘導的腫瘤在手術(shù)后及未手術(shù)情況下轉移的動(dòng)力學(xué)相近，可以用作手術(shù)后及未手術(shù)模型。 跟其他腫瘤模型相比，由于4T1的抗6-硫鳥(niǎo)嘌噙特性，微小的轉移細胞團(少到僅僅1個(gè))也可以在許多遠端器官中檢測到。

該細胞通過(guò)慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。

細胞特性

1）來(lái)源：小鼠乳腺癌

2）形態(tài)：上皮細胞樣 貼壁生長(cháng)

3）含量：>1x106 細胞數

4）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

細胞篩選

該細胞為穩定轉染Luc的細胞，隨細胞傳代次數的增加，其Luc熒光強度會(huì )逐漸減弱。若實(shí)驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。        

建議收到細胞后至少傳3代，凍存留種后再進(jìn)行篩選。

初次進(jìn)行細胞篩選時(shí)，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養基維持培養，若無(wú)細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養基繼續篩選，以此類(lèi)推，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過(guò)程中，漂浮細胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養基培養，至細胞密度約80%，可繼續加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時(shí)細胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養基正常培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長(cháng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來(lái)終止消化。 

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長(cháng)活力，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時(shí)凍存一批細胞種子以備后續實(shí)驗使用。

下面T25瓶為例；

1. 細胞凍存時(shí)按照細胞傳代的過(guò)程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來(lái)決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個(gè)活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個(gè)活細胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱(chēng)、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過(guò)夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

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