LLC+luc小鼠肺癌細胞熒光素酶標記

,LLC/luc

貨號：YJ-0078a（LLC種屬鑒定）

價(jià)格： 3200.0

規格： 1x10⁶

細胞描述

Lewis肺癌是一種從C57BL小鼠的肺中建立的細胞系，該細胞帶有原發(fā)性Lewis肺癌的植入所致的腫瘤，被廣泛用作轉移的模型，可用于研究癌癥化學(xué)治療劑的機制。

該細胞通過(guò)慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。

細胞特性

來(lái)源：小鼠肺癌組織

形態(tài)：半貼壁生長(cháng)，混合形態(tài)，有上皮細胞樣，松散貼壁或懸浮有梭形、圓形等細胞形態(tài) 。

含量：含量：>1x10⁶  細胞數

規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途：僅供科研使用。

細胞篩選

該細胞為穩定轉染Luc的細胞，隨細胞傳代次數的增加，其Luc熒光強度會(huì )逐漸減弱。若實(shí)驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。        

建議收到細胞后至少傳3代，凍存留種后再進(jìn)行篩選。

初次進(jìn)行細胞篩選時(shí)，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養基維持培養，若無(wú)細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養基繼續篩選，以此類(lèi)推，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過(guò)程中，漂浮細胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養基培養，至細胞密度約80%，可繼續加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時(shí)細胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養基正常培養。

一．培養基及培養凍存條件準備：

1) 準備：1640 基礎培養基(推薦：YJ-0002)，優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %，P/S 1 %

2) 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二．細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

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