ZJU-0430+luc人膽囊癌細胞+luc

,ZJU0430 luc

貨號：YJ-0024a（STR（ZJU0430鑒定））

價(jià)格： 3200.0

規格： 1*10 ⁶

細胞描述

細胞是從一名74歲男性胃膽囊癌患者組織中分離得到，ZJU-0430的遷移，侵襲和增殖能力遠大于GBC-SD細胞，可用于膽囊癌（GBC）的發(fā)病機理和治療的臨床前研究，并可能有助于開(kāi)發(fā)早期診斷工具以及潛在的靶向療法。

該細胞通過(guò)慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。

細胞特性

1） 來(lái)源：人，男性，膽囊癌

2） 形態(tài)：上皮樣，貼壁生長(cháng)

3） 含量：>1x10⁶  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

細胞篩選

該細胞為穩定轉染Luc的細胞，隨細胞傳代次數的增加，其Luc熒光強度會(huì )逐漸減弱。若實(shí)驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。        

建議收到細胞后至少傳3代，凍存留種后再進(jìn)行篩選。

初次進(jìn)行細胞篩選時(shí)，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養基維持培養，若無(wú)細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養基繼續篩選，以此類(lèi)推，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過(guò)程中，漂浮細胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養基培養，至細胞密度約80%，可繼續加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時(shí)細胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養基正常培養。

一．培養基及培養凍存條件準備：

1) 準備：1640 基礎培養基(推薦：YJ-0002)，優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %，P/S 1 %

2) 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二．細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

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