研制針對特殊細胞系或原代培養的無(wú)血清培養基主要有兩種方法.*種方法是找到一個(gè)相關(guān)細胞類(lèi)型的培養基已知配方,加入或不加10%~20%的透析血清,在減少血清的同時(shí),逐一或成組的改變培養基成分直到培養基達到你所特殊需要的*條件.這種方法zui初由Ham及其同事[Ham,1984]采用,通常能提供*培養條件.如果發(fā)現一組成分對血清的減少起到補充的作用,那就通過(guò)單種成分的逐步逐一刪除將這一活性成分從中篩選出來(lái)然后尋找其*濃度[Ham,1984].當然,這是一項耗時(shí)而繁雜的工作,包括繪制細胞生長(cháng)的生長(cháng)曲線(xiàn),每個(gè)階段做克隆生長(cháng)分析,找到一種適合新細胞類(lèi)型的新培養基至少要三年時(shí)間. 

由于*種方法耗費時(shí)間長(cháng),使人們想到了第二種方法:對現在培養基,如RP-MI1640或DMEM與Ham’s F12的聯(lián)合培養基加以補充,而且將加入成分的種類(lèi)限制在一個(gè)較小的范圍內,僅包括硒,轉鐵蛋白,白蛋白,胰島素,氫化可地松,雌激素,三磺甲狀腺氨酸,乙醇胺,磷酸乙醇胺,生長(cháng)因子（EGF,FGF,PDGF,內皮生長(cháng)添加物等）,前列腺素和其他有特殊功能的物質(zhì).通常對多數細胞而言,硒,轉鐵蛋白,胰島素都很重要,但對其他成分的需求則差別較大.